人低氧誘導(dǎo)因子2ELISA試劑盒標(biāo)本的采集與保存

瀏覽次數(shù)：759發(fā)布日期：2022-11-16

人低氧誘導(dǎo)因子2ELISA試劑盒標(biāo)本的采集與保存：

1、血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2 小時(shí)或4oC 過夜，然后1000×g 離心20 分鐘，取上清即

可，或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2、血漿：用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘，

取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3、組織勻漿：

1）取適量組織塊，于預(yù)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）；

2）可同時(shí)選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨，該過程需在冰上進(jìn)行（有條件實(shí)驗(yàn)室可選用機(jī)器勻漿）；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理（超聲破碎過程中注意冰浴降溫；反復(fù)凍融法可重復(fù)2 次）。

3）將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘，留取上清即可檢測(cè)。

4、其它生物標(biāo)本：請(qǐng)1000×g 離心20 分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

1000 人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HBMEC) ( 5×105 )

1100 人腦血管平滑肌細(xì)胞 (HBVSMC)( 5×105 )

1200 人腦血管周細(xì)胞 (HBVP) ( 5×105 )

1300 人脈絡(luò)絲內(nèi)皮細(xì)胞 (HCPEC)( 5×105 )

1310 人脈絡(luò)絲表皮細(xì)胞 (HCPEpiC)( 5×105 )

1320 人脈絡(luò)絲成纖維細(xì)胞 (HCPF)( 5×105 )

1400 人腦膜細(xì)胞 (HMC)( 5×105 )

1520 人神經(jīng)細(xì)胞（HN) (10×106 )

1530 人小腦顆粒細(xì)胞 (HCGC)( 5×105 )

1540 人海馬趾神經(jīng)細(xì)胞(HN-h)(1×106)